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【PPT】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)【23頁(yè)P(yáng)PT課件】 - 醫(yī)學(xué)資源下載

2013-08-04 05:00 閱讀:449 來(lái)源:愛(ài)愛(ài)醫(yī) 責(zé)任編輯:愛(ài)愛(ài)醫(yī)資源網(wǎng)
[導(dǎo)讀] 【PPT】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)【23頁(yè)P(yáng)PT課件】 - 醫(yī)學(xué)資源下載 資源作者:沙漠雪狼 資源分類:藥物 - 臨床藥學(xué) 資源屬性:PPT 資源售價(jià):1 愛(ài)醫(yī)幣 資源大?。?.52M 關(guān)注入數(shù):517 人
【PPT】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)【23頁(yè)P(yáng)PT課件】 - 醫(yī)學(xué)資源下載
資源作者:沙漠雪狼
資源分類:藥物 - 臨床藥學(xué)
資源屬性:PPT
資源售價(jià):1 愛(ài)醫(yī)幣
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下載人數(shù):6人
上傳日期:2012-12-27 09:22:44
【ppt】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)【23頁(yè)P(yáng)PT課件】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn) 概況 葡萄球菌屬微球菌科,本菌有19個(gè)菌種,從人體上可檢出12個(gè)種。 葡萄球菌屬主要與皮膚腺體和溫血?jiǎng)游锏恼衬は嚓P(guān)系,有些種是人及動(dòng)物的條件致病菌?!緋pt】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)【23頁(yè)P(yáng)PT課件】 金黃色葡萄球菌對(duì)人類有致病性,通常被稱為病原性球菌。金黃色葡萄球菌可引起化膿性炎癥,又稱為化膿性球菌。 金黃色葡萄球菌的生物學(xué)特性 形態(tài)與染色: 金黃色葡萄球菌的典型形態(tài)呈球形,直徑0.4~1.2?m,大小不一,平均直徑約為0.8?m。 革蘭氏染色陽(yáng)性,呈葡萄串狀排列。無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞。在陳舊培養(yǎng)物中,衰老的菌體常轉(zhuǎn)為革蘭氏陰性。 【ppt】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)【23頁(yè)P(yáng)PT課件】 培養(yǎng)特性: 易培養(yǎng),對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好。 需氧或兼性厭氧。 最適生長(zhǎng)溫度37℃,最適生長(zhǎng)pH 7.4。耐鹽性強(qiáng),在含10~15%的氯化鈉培養(yǎng)基中仍能生長(zhǎng),可用于篩選菌種。 在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上培養(yǎng)18~24h,可形成圓形、表面光滑、不透明的菌落??僧a(chǎn)生金黃色色素,色素為脂溶性,不溶于水,故色素只局限于菌落內(nèi),不滲至培養(yǎng)中。 在血平板上可形成明顯透明的溶血環(huán)。為β型溶血。 可產(chǎn)生卵磷脂,在卵黃高鹽培養(yǎng)基上形成周圍有白色沉淀環(huán)的菌落。 大多數(shù)菌株分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。甲基紅試驗(yàn)、 VP試驗(yàn)多為陽(yáng)性,不產(chǎn)生靛基質(zhì)。觸酶陽(yáng)性。 金黃色葡萄球菌的酶 金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生血漿凝固酶和耐熱DNA酶。這兩種酶均與金黃色葡萄球菌的致病性有關(guān)。 血漿凝固酶:與金黃色葡萄球菌的致病力密切相關(guān)。一般認(rèn)為,血漿凝固陽(yáng)性的金黃色葡萄球菌菌株有致病力。否則為無(wú)力的菌株。血漿凝固酶對(duì)熱穩(wěn)定,能抵抗60℃30min甚至100℃30min后,仍能保存大部分活性。 耐熱DNA酶作為除血漿凝固酶外鑒定金黃色葡萄球菌致病力的指標(biāo)之一。該酶的最適pH為9.0?!緋pt】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)【23頁(yè)P(yáng)PT課件】 金黃色葡萄球菌腸毒素:是金黃色葡萄球菌一種重要的致病物質(zhì)。本菌引起的食物中毒是因?yàn)槭称肺廴玖私瘘S葡萄球菌后,由細(xì)菌產(chǎn)生大量腸毒素而導(dǎo)致的。 近年報(bào)導(dǎo)表明,50%以上的金黃色葡萄球菌菌株在實(shí)驗(yàn)室條件下可產(chǎn)生腸毒素,并且1個(gè)菌株能產(chǎn)生兩種或兩種以上的腸毒素。 腸毒素是一種可溶性蛋白質(zhì),由單個(gè)無(wú)分支的肽鏈組成。分子量約為3000左右。易溶于水,難溶于有機(jī)溶劑。 耐熱,經(jīng)100℃煮沸30min不被破壞,也不受胰蛋白酶的影響。食物中的腸毒素耐熱性更強(qiáng),一般烹調(diào)溫度不能將其破壞。218~248 ℃的油中需30min才能被破壞。可引起急性胃腸炎。 根據(jù)腸毒素的血清型,可分A、B、C(C1、C2)、D、E 5 個(gè)型。A型腸毒素引起的食物中毒較多,約占50%左右。其他依次為D、C、B和E型。也有A+D、A+B、A+C、B+C等。 A型腸毒素毒力較強(qiáng),攝入1μg即可引起中毒;B型毒力較弱攝入25μg,才引起中毒。一般認(rèn)為引起人中毒的最小劑量是1.0~7.2μg/kg。 金黃色葡萄球菌的檢測(cè)程序 增菌培養(yǎng)基【ppt】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)【23頁(yè)P(yáng)PT課件】 7.5%氯化鈉肉湯:為葡萄球菌選擇性增菌培養(yǎng)基,因金黃色葡萄球有耐受高鹽的特性,因而能在此增菌液中生長(zhǎng),除某些嗜高鹽的海洋菌外,大多數(shù)細(xì)菌都被增菌液中的高鹽所抑制。 胰酪胨大豆肉湯:含氯化鈉達(dá)10%,以胰酪胨替代牛肉浸粉,并加入少量磷酸氫二鉀和葡萄糖促進(jìn)葡萄球菌的生長(zhǎng)。 樣品的稀釋 固體和半固體樣品:稱取25g樣品至盛有225 mL磷酸鹽緩沖稀釋液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內(nèi),8000r/min~10000 r/min均質(zhì)1min~2min,或放入盛有225 mL稀釋液的無(wú)菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1min~2min,制成1:10的樣品勻液。 液體樣品:以無(wú)菌吸管吸取25mL樣品至盛有225mL磷酸鹽緩沖稀釋液或生理鹽水的無(wú)菌錐形瓶(瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無(wú)菌玻璃珠)中,充分混勻,制成1:10的樣品勻液。 增菌與分離培養(yǎng) 增菌培養(yǎng):吸取5mL上述樣品勻液,接種于50mL 7.5%氯化鈉肉湯或10%胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基內(nèi),36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。金黃色葡萄球菌在7.5%氯化鈉肉湯中呈混濁生長(zhǎng),污染嚴(yán)重時(shí)在10%胰酪胨大豆肉湯內(nèi)呈混濁生長(zhǎng)。 將上述培養(yǎng)物,分別劃線接種到Baird-Parker平板和血平板,血平板36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。Baird-Parker平板36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h或45h~48h。 分離培養(yǎng)基 Baird-Parker瓊脂:培養(yǎng)基中含有卵黃亞碲酸鉀,能抑制大多數(shù)細(xì)菌的繁殖,并能促進(jìn)金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)使其產(chǎn)生黑色和暈圈。培養(yǎng)基中的丙酮酸鈉和甘氨酸也能促進(jìn)金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)。【ppt】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)【23頁(yè)P(yáng)PT課件】 金黃色葡萄球菌的菌落形態(tài):圓形、光滑凸起、濕潤(rùn),直徑約2~3mm,顏色呈灰色到黑色,邊緣為淡色,周圍為一混濁帶,在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落似有奶油樹(shù)膠的硬度,偶爾可見(jiàn)無(wú)混濁帶和透明圈的非典型菌落。 長(zhǎng)期保存的冷凍或干燥食品中所分離的菌落比典型菌落所產(chǎn)生的黑色較淡些,外觀可能粗糙并干燥。 分離培養(yǎng)基 血瓊脂:是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含有5%的脫纖維血(羊血或兔血)。用于觀察金黃色葡萄球菌的溶血現(xiàn)象。金黃色葡萄球菌在血瓊脂平板上呈β溶血。 金黃色葡萄球菌的菌落形態(tài):呈金黃色,有時(shí)也呈白色,大而突起,圓形、不透明、表面光滑,周圍有透明的β溶血環(huán)。 革蘭氏染色 血漿凝固酶試驗(yàn) 試驗(yàn)原理:致病性的金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的血漿凝固酶,使血漿中纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w蛋白,附著于細(xì)菌表面 ,產(chǎn)生凝固。 金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生兩種凝固酶:一種是與細(xì)胞壁結(jié)合的凝固酶,為結(jié)合凝固酶;另一種是菌細(xì)胞釋放于培養(yǎng)基中,為游離凝固酶。二者的抗原性不同。 血漿凝固酶試驗(yàn) 挑取Baird-Parker平板或血平板上可疑菌落1個(gè)或以上,分別接種到5mL BHI和營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面,36℃±1℃培養(yǎng)18 h~24 h。 取新鮮配置兔血漿0.5mL,放入小試管中,再加入可疑菌落的BHI培養(yǎng)物0.2mL~0.3mL,振蕩搖勻,置36℃±1℃溫箱或水浴箱內(nèi),每半小時(shí)觀察一次,觀察6h,如呈現(xiàn)凝固(即將試管傾斜或倒置時(shí),呈現(xiàn)凝塊)或凝固體積大于原體積的一半,判定為陽(yáng)性結(jié)果。 同時(shí)以血漿凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性和陰性葡萄球菌菌株的肉湯培養(yǎng)物作為對(duì)照。 結(jié)果如可疑,挑取營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面的菌落到5mL BHI,36℃±1℃培養(yǎng)18h~48h,重復(fù)實(shí)驗(yàn)。 【ppt】金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)【23頁(yè)P(yáng)PT課件】 結(jié)果報(bào)告 如血漿凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性,可判定為金黃色葡萄球菌 。 報(bào)告在25g(mL)樣品中檢出或未檢出金黃色葡萄球菌。 謝謝!
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