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【DOC】FDA金黃色葡萄球菌檢測方法 - 醫(yī)學(xué)資源下載
資源作者：沙漠雪狼
資源分類：藥物 - 臨床藥學(xué)
資源屬性：文檔
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上傳日期：2012-12-27 09:27:17

FDA金黃色葡萄球菌檢測方法 黃色葡萄球菌—概述根據(jù)《伯杰氏鑒定細(xì)菌學(xué)手冊》，按葡萄球菌的生理化學(xué)組成，將葡萄球菌分為金黃色葡萄球菌(Staphylococcus?aureus)、表皮葡萄球菌(S.?epidermidis)和腐生葡萄球菌(S.?saprophyticus)，其中金葡多為致病性菌，表葡偶爾致病。金黃色葡萄球菌是人類化膿性感染中最常見的病原菌?？梢鹁植炕撔愿腥?，如癤、癰、皮下膿腫、外科切口及燒傷創(chuàng)面的感染；也可引起肺炎、偽膜性腸炎、腎盂腎炎、心包炎等多系統(tǒng)的化膿性感染；還可引起敗血癥、膿毒癥等全身性感染。葡萄球菌的致病力強(qiáng)弱主要取決于其產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶。??金黃色葡萄球菌—生物學(xué)特性金黃色葡萄球菌呈球形，直徑0.8μm左右，排列成葡萄串狀?，無芽孢，無莢膜。金黃色葡萄球菌—生長特性金黃色葡萄球菌在肉湯中呈渾濁生長，在胰酪胨大豆肉湯內(nèi)有時(shí)液體澄清，菌量多時(shí)呈渾濁生長。金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)—方法適用性MPN法：適用于檢測帶有大量競爭菌的食品及其原料和未經(jīng)處理的含少量金黃色葡萄球菌的食品。直接平板計(jì)數(shù)法：適用于檢查金黃色葡萄球菌數(shù)不小于10/g（ml）的食品。增菌培養(yǎng)法：適用于檢查含有受損傷的金黃色葡萄球菌的加工食品。?????????????金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)——直接平板計(jì)數(shù)法???????????????????（FDA?BAM?&ISO）1.檢樣（50g+450mL稀釋液）2.?適當(dāng)十倍稀釋樣品3.選擇2~3個(gè)連續(xù)適宜稀釋度4.吸取1ml菌液按照0.3mL、0.3mL、0.4mL分別涂布于3塊90mmBaird-Parker平板上（做平行試驗(yàn)）?????FDA金黃色葡萄球菌檢測方法 ??35℃?，45~48?h5.確證試驗(yàn)報(bào)告FDA?BAM?金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)—MPN法1.檢樣（50g+450mL稀釋液）2.適當(dāng)十倍稀釋樣品3.選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品稀釋液，每個(gè)稀釋度接種三管10%?NaCl?TSB肉湯，每管接種1mL?????????????35℃?，48?±2?h4.從生長的管中接種1環(huán)劃線于?Baird-Parker平板上?????????35℃?，48?h5.確證試驗(yàn)6.報(bào)告FDA?BAM?金黃色葡萄球菌確證試驗(yàn)1.凝固酶試驗(yàn)方法：從平板上至少挑取1個(gè)可疑金黃色葡萄球菌菌落，移種到TSB/BHI肉湯中，置35℃培養(yǎng)18-24h。取肉湯培養(yǎng)物0.3mL同0.5mL凝固酶試驗(yàn)兔血漿充分混合，置35℃培養(yǎng)，定時(shí)觀察是否有凝塊形成，至少觀察6h。試驗(yàn)中需同時(shí)做已知陽性和陰性對照。結(jié)果判定：以內(nèi)容物完全凝固，使試管倒置或傾斜時(shí)不流動(dòng)為陽性。部分凝固（2+和3+）的必須進(jìn)行生化鑒定加以證實(shí)。 FDA金黃色葡萄球菌檢測方法 FDA?BAM金黃色葡萄球菌確證試驗(yàn)2.革蘭氏染色對所有的可疑培養(yǎng)物都要進(jìn)行革蘭氏染色。3.生化鑒定 過氧化氫酶試驗(yàn) 葡萄糖厭氧利用試驗(yàn) 甘露醇厭氧利用試驗(yàn) 金葡溶菌酶敏感性試驗(yàn) 耐熱核酸酶試驗(yàn)（輔助）ISO?金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)—MPN法1.檢樣（xg+9xmL稀釋液）2.適當(dāng)十倍稀釋樣品3.選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品稀釋液，每個(gè)稀釋度接種三管modified?Giolitti?and?Cantoni?broth，????? ?????????????37℃?，24~48?h4.從變黑或出現(xiàn)黑色沉淀的管中接種1環(huán)培養(yǎng)物于?Baird-Parker平板上???????????????37℃?，48?h5.確證試驗(yàn)6.報(bào)告 FDA金黃色葡萄球菌檢測方法

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