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淋病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

淋病是一種常見(jiàn)的性病，在我國(guó)有著很高的感染人數(shù)，對(duì)人體有著很大的危害，但近幾年來(lái)，從我國(guó)的淋病疫情數(shù)據(jù)分析中，揭示出很多的問(wèn)題，淋病的人數(shù)是有著下降的趨勢(shì)的，并且男女比例有著很大的差異，從數(shù)據(jù)分析來(lái)看，目前仍然存在著淋病病例（特別是女性病例）發(fā)現(xiàn)不足，這個(gè)原因有很多，但檢測(cè)篩查的力度不足是一個(gè)重要的原因，很多的醫(yī)療機(jī)構(gòu)，對(duì)淋病的檢測(cè)還有著一些不正確的認(rèn)識(shí)，下面就淋病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)做一個(gè)簡(jiǎn)單的分析。

一、淋病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法

目前，我國(guó)淋病的實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)方法為：直接顯微鏡檢查淋球菌；分離培養(yǎng)淋球菌；核酸檢測(cè)。

1、直接顯微鏡檢查淋球菌：

在顯微鏡直接檢查中，染色是很重要的一步，染色方法一般常用的是革蘭氏染色，還有美蘭染液，姬姆薩染液，熒光抗體。革蘭染色為傳統(tǒng)方法，因簡(jiǎn)便、快捷及價(jià)廉，仍然為最廣泛采用的方法。革蘭染色將菌分為二大類，即染成紫色的革蘭陽(yáng)性菌及染成紅色的革蘭陰性菌。

直接顯微鏡檢查的臨床意義：男性淋菌性尿道炎的尿道標(biāo)本敏感性及特異性可高達(dá)95%～99%，具診斷價(jià)值；宮頸標(biāo)本、無(wú)癥狀男性尿拭子及取自直腸的涂片時(shí)，敏感性僅40～70%；不推薦直接顯微鏡檢查診斷直腸和咽部淋球菌感染；亦不能用于療后判愈；如果在多形核細(xì)胞外見(jiàn)到形態(tài)典型的革蘭陰性雙球菌，需做培養(yǎng)進(jìn)行確證。

2、淋球菌培養(yǎng)：

培養(yǎng)條件：35℃～36℃，含5%～10%CO2，濕潤(rùn)（70%濕度）的環(huán)境。CO2環(huán)境可由CO2培養(yǎng)箱、CO2產(chǎn)氣袋及燭缸提供。使用燭缸時(shí)，應(yīng)使用白色、無(wú)芳香味的無(wú)毒性蠟燭，在燭缸底部放些浸水棉球以保持一定的濕度。培養(yǎng)時(shí)間：24～48小時(shí)。

培養(yǎng)24小時(shí)后檢查平皿，此時(shí)沒(méi)有菌生長(zhǎng)的平皿應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至48小時(shí)，仍無(wú)菌生長(zhǎng)才可丟棄，作出淋球菌培養(yǎng)陰性的報(bào)告，對(duì)選擇性培養(yǎng)基上分離的直徑在0.5～1mm，無(wú)色、灰白色的半透明菌落應(yīng)作進(jìn)一步鑒定。

對(duì)結(jié)果初步鑒定淋球菌的主要依據(jù)，一個(gè)是看菌落特征，還有就是氧化酶試驗(yàn)，以及革蘭染色。

來(lái)自泌尿生殖道符合初步鑒定標(biāo)準(zhǔn)的分離株，一般可診斷為淋球菌，準(zhǔn)確性達(dá)98%。對(duì)于菌落形態(tài)不典型的分離株，來(lái)自咽部、眼睛、或其他泌尿生殖道外部位的分離株，來(lái)自低危人群（如兒童）的分離株，以及涉及醫(yī)療法律案例的分離株，應(yīng)作確證試驗(yàn)。主要有糖發(fā)酵試驗(yàn)或細(xì)菌自動(dòng)鑒定儀等。

分離培養(yǎng)法為淋病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，女性淋病患者，男、女直腸和咽部淋球菌感染培養(yǎng)的敏感性81～100%。特異性100%，可發(fā)現(xiàn)無(wú)癥狀淋球菌感染患者，可用于進(jìn)一步作藥敏試驗(yàn)，可用于治療后的判愈試驗(yàn)。

但大部分醫(yī)療機(jī)構(gòu)的臨床上都不開(kāi)展培養(yǎng)，因?yàn)樵囼?yàn)需要一定的時(shí)間，而且整個(gè)試驗(yàn)操作較為繁瑣，對(duì)醫(yī)生的確診來(lái)說(shuō)，花的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，不能及時(shí)給病人診斷和治療。

3、核酸檢測(cè)：

目前在我國(guó)，核酸檢測(cè)還在發(fā)展之中，還有待進(jìn)一步的完善，但這個(gè)檢測(cè)方法是未來(lái)的趨勢(shì)，在以后的工作中，一定會(huì)作為一種常規(guī)的檢測(cè)，以更加利于疾病的診斷。

核酸檢測(cè)一般有：經(jīng)典方法，實(shí)時(shí)熒光法，全自動(dòng)及快速法，目前國(guó)內(nèi)大部分用的是熒光法。

它的特點(diǎn)是：敏感性、特異性高；不依賴于活的病原體的存在；無(wú)需特殊運(yùn)送條件；可采用尿液等非侵入性標(biāo)本；可以做多重項(xiàng)目的檢測(cè)。

核酸擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)用于臨床診斷面臨的挑戰(zhàn)有：所需的儀器設(shè)備和試劑價(jià)格比較昂貴，在一般實(shí)驗(yàn)室尚不能配備；不能做抗生素敏感性試驗(yàn)；用于判愈試驗(yàn)需在治療后至少3周以上。

二、標(biāo)本的采集

淋病的檢測(cè)中，標(biāo)本的采集尤其重要，如果沒(méi)有規(guī)范的采集好標(biāo)本，對(duì)試驗(yàn)的結(jié)果是有很大的影響的，可能會(huì)造成不正確的結(jié)果，對(duì)淋病的臨床確診做出錯(cuò)誤的判斷。

從人群分類采樣：

1、男性：異性戀者，采集尿道標(biāo)本，有口淫史者加取咽部標(biāo)本；同性戀者，采集尿道、直腸及咽部標(biāo)本。

2、女性：采集宮頸標(biāo)本，必要時(shí)從尿道、直腸、咽部、前庭大腺和尿道旁腺取材。

3、幼女：幼女和/或處女膜未破的感染者標(biāo)本：采集陰道分泌物。

4、新生兒眼炎患者：采集眼結(jié)膜分泌物。

從采樣部位分類：

1、尿道：男性患者，用手指從陰莖根部向尿道口方向擠壓，有癥狀患者可擠出膿液，用取樣拭子蘸取膿液作涂片或培養(yǎng)。對(duì)擠壓后無(wú)明顯分泌物時(shí)，采用男用取材拭子插入尿道2～3cm，稍用力轉(zhuǎn)動(dòng)，保留數(shù)秒鐘再取出，以采集到粘膜上皮細(xì)胞。

女性患者，可抵著恥骨聯(lián)合輕輕按摩尿道口，擠壓出分泌物。如果無(wú)明顯分泌物，可用同男性相似的上述方法取材。

2、宮頸：避免使用防腐劑和潤(rùn)滑劑，因?yàn)檫@些物質(zhì)對(duì)淋球菌有抑制作用。仔細(xì)檢查陰道壁和宮頸，如果宮頸口外面的分泌物較多，先用無(wú)菌棉拭清除過(guò)多的宮頸粘液。將一取樣拭子插入宮頸管內(nèi)1～2cm，稍用力轉(zhuǎn)動(dòng)，保留10～30秒后取出。

3、眼部：用男性采樣拭子在眼結(jié)膜處蘸取分泌物或輕繞眼結(jié)膜。

4、直腸：將取樣拭子插入肛門2～3cm，從緊靠肛環(huán)邊的隱窩中取材，避免接觸糞便。

5陰道：青春期前女孩可采集陰道標(biāo)本。將取樣拭子置于陰道后穹窿10～15秒，采集陰道分泌物。

6、咽部：從咽后壁或扁桃體隱窩取材。

三、藥敏試驗(yàn)

近年來(lái)全球淋病流行趨勢(shì)嚴(yán)峻，淋病已成為全球公共衛(wèi)生熱點(diǎn)，淋病的耐藥越來(lái)越引起重視，未來(lái)淋病的發(fā)展形勢(shì)嚴(yán)峻。

目前耐藥檢測(cè)監(jiān)測(cè)技術(shù)面臨的挑戰(zhàn)：耐藥監(jiān)測(cè)點(diǎn)的覆蓋面不全面，不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)臨床治療失敗病例，臨床上不能精準(zhǔn)規(guī)范用藥，對(duì)耐藥的科學(xué)研究開(kāi)展不足。

為了做好耐藥工作，我國(guó)制定了《遏制細(xì)菌耐藥國(guó)家行動(dòng)計(jì)劃（2016-2020年）》，進(jìn)一步加強(qiáng)抗菌藥物臨床應(yīng)用管理。

目前耐藥方法有：瓊脂紙片擴(kuò)散法（定性），Etest（定量），瓊脂稀釋法（定量），微量稀釋法（定量），全自動(dòng)細(xì)菌鑒定分析儀（定性），質(zhì)譜法（MALDITOF）（定性），分子生物學(xué)方法（定性）。一般常用的為瓊脂紙片擴(kuò)散法和Etest。

1、瓊脂紙片擴(kuò)散法：

特點(diǎn)：快速，簡(jiǎn)便，價(jià)廉，但只能用于定性，已經(jīng)有大量的商品化生產(chǎn)，可以及時(shí)指導(dǎo)臨床用藥。

2、Etest法：

特點(diǎn)：快速，簡(jiǎn)便，可以進(jìn)行定量，但價(jià)格高價(jià)高，也已經(jīng)有了商品化的生產(chǎn)?？梢杂糜谥笇?dǎo)臨床用藥，同時(shí)可以作為耐藥的監(jiān)測(cè)。