一、摘要過簡、內(nèi)容空泛
用重疊延伸多聚酶鏈式反應(OE—PCR)制備含鴨乙肝病毒前核心區(qū)終止密碼突變的基因片段。通過不對稱多聚酶鏈式反應(ASy-PCR)制備單鏈DNA模板,測序證實該點突變存在。簡略討論了OE-PCR制備人工向點突變的優(yōu)缺點及減少PCR成熟滲入的條件。
改:目的制備含鴨乙型肝炎病毒(DHBV)前核心區(qū)終止密碼突變的基因片段,以對此基因突變作有關生物學研究。方法用重疊延伸多聚酶鏈式反應(OE—PCR)制備含此人工定向點突變的基因片段用不對稱多聚酶鏈式反應(ASyPCR)制備維鏈DNA模板測序。結果凝膠電泳顯示OE—PCR產(chǎn)物與克隆DHBVDNA酶切片段位置一致,測序證實該點突變存在。結論用OE.PCR作人工定向基因突變,不需要克隆制備單鏈模板及篩選陽性克隆,2天內(nèi)即可出結果.較傳統(tǒng)方法簡便、快速、有效。
二、摘要結構松散、敘述不明
目的尿素酶基因(UU)上的不同引物對UU14個血清型的檢出率和檢出敏感性進行了比較。方法以UU尿素酶基因為靶序列,設計5對引物,用PCR擴增UUI~14個血清型和系列稀釋的UU8DNA,用OLIGO程序分析引物序列與PCR敏感性間的關系。結果發(fā)現(xiàn)不同位置的引物對14個型的擴增結果反映出其生物型間的差異,且不同引物的檢測敏感性相差40倍。結論對引物參數(shù)的分析表明,引物自由能譜之比影響著PCR擴增敏感性。對臨床標本的檢測證明,僅UU1+B引物組合檢出率達100%,其引物組合均有不同程度漏檢。
改:目的篩選解脲脲原體(UU)尿素酶基因上的不同引物及擴增模板區(qū),使擴增敏感性達到最佳。方法以UU尿素酶基因為靶序列,設計5對引物,用聚合酶鏈反應(PCR)擴增UUI~14血清型和系列稀釋的UUSDNA,用OLIGO程序分析引物序列與PCR敏感性間的關系。結果不同種的引物對14個血清型的擴增結果有差異。引物U1+B、U1+2、UA+B、U2+A、及U1+C對14個血清型的檢出率分別為l00%,86%,78%,64%及64%。結論引物自由能譜之比影響著PCR擴增的敏感性。U1+B引物擴增敏感性最佳。
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