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有絲分裂是生命科學(xué)的基礎(chǔ)實驗，本文對該實驗的原理、要求、所需材料、實驗用品、方法、觀察、實驗小竅門、以及分裂的圖片進(jìn)行展示。

實驗原理

在植物體中，有絲分裂常見于根尖、莖尖等分生區(qū)細(xì)胞。高等植物細(xì)胞有絲分裂的過程，分為分裂間期和有絲分裂的前期、中期、后期、末期?？梢杂酶弑剁R觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程，根據(jù)各個時期細(xì)胞內(nèi)染色體或染色質(zhì))的變化情況，識別該細(xì)胞處于有絲分裂的哪個時期。細(xì)胞核內(nèi)的染色體容易被堿性染料(如龍膽紫、醋酸洋紅)溶液著色。

目的要求

1.觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程，識別有絲分裂的不同時期。

2.學(xué)會制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的生物技術(shù)。

3.學(xué)會使用高倍鏡和繪生物圖的方法。

材料

洋蔥(可以用蒜、蔥代替)。

用具

顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿3個，、剪刀，鑷子，滴管。

藥品

質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸，酒精的體積分?jǐn)?shù)為95%的溶液，龍膽紫的質(zhì)量濃度為 0.01 g/mL的或 0.02 g/mL的溶液(或醋酸洋紅液)。

方法步驟

一、洋蔥根尖的培養(yǎng)

在上實驗課之前的3d～4d，取洋蔥一個，放在廣口瓶上。瓶內(nèi)裝滿清水，讓洋蔥的底部接觸到瓶內(nèi)的水面。把這個裝置放在溫暖的地方，注意經(jīng)常換水，使洋蔥的底部總是接觸到水。待根長5 cm時，可取生長健壯的根尖制片觀察。

二、裝片的制作

1.解離 下午2時是洋蔥有絲分裂的高峰期，可在此時剪取洋蔥的根尖 2 mm～ 3 mm，立即放入盛有氯化氫的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為匕%的溶液和酒精的體積分?jǐn)?shù)為95%溶液的混合液(1：1)的玻璃皿中，在室溫下解離3 min～5 min后取出根尖。

2.漂洗 待根尖酥軟后，用鑷子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗約10 min.

3.染色 把洋蔥根尖放進(jìn)盛有龍膽紫的質(zhì)量濃度為 0.01g/mL或 0.02 g/mL的溶液(或醋酸洋紅液)的玻璃皿中，染色3 min～5 min。

4.制片用鑷子將這段洋蔥根采取出來，放在載玻片上，加一滴清水，并且用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片。然后，用拇指輕輕地壓蓋玻片，這樣可以使細(xì)胞分散開來。

三、洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察

1.低倍鏡觀察

把制作成的洋蔥根尖裝片先放在低倍鏡下觀察，慢慢移動裝片，要求找到分生巨細(xì)胞，它的特點是：細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞正在分裂。

2.高倍鏡觀察

找到分生區(qū)細(xì)胞后，把低倍鏡移走，換上高倍鏡，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰，直到看清細(xì)胞物像為止。

3.仔細(xì)觀察，可先找出處于細(xì)胞分裂期中期的細(xì)胞，然后再找出前期、后期、末期的細(xì)胞。注意觀察各個時期細(xì)胞內(nèi)染色體變化的特點。

4.在一個視野里，往往不容易找全有絲分裂過程中各個時期的細(xì)胞。如果是這樣，可以慢慢地移動裝片，從鄰近的分生區(qū)細(xì)胞中尋找。

5.如果自制裝片效果不太理想，可以觀察教師演示的洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的固定裝片。

四、繪圖

在觀察清楚有絲分裂各個時期的細(xì)胞以后，繪出洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂簡圖。繪圖的要求：繪植物細(xì)胞有絲分裂中期圖(含4個染色體)。