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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)

2012-08-29 13:46 閱讀:2131 來(lái)源:愛(ài)愛(ài)醫(yī) 責(zé)任編輯:潘樂(lè)樂(lè)
[導(dǎo)讀] 材料: 6孔板 marker筆 直尺 20微升槍頭(滅菌) 無(wú)血清培養(yǎng)基 PBS 準(zhǔn)備: 所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺(tái)內(nèi)) 流程: 1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃?rùn)M線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過(guò)孔。每

    材料:

    6孔板
    marker筆
    直尺
    20微升槍頭(滅菌)
    無(wú)血清培養(yǎng)基
    PBS

    準(zhǔn)備:

    所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺(tái)內(nèi))

    流程:

    1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃?rùn)M線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過(guò)孔。每孔至少穿過(guò)5條線。
    2、在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過(guò)夜能鋪滿(mǎn)。
    3、第二天用槍頭比著直尺,盡量垂直于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不要傾斜。
    4、用PBS洗細(xì)胞3次,去除劃下的細(xì)胞,加入無(wú)血清培養(yǎng)基。
    5、放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0、6、12、24小時(shí)取樣,拍照。


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